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由于高速公路比普通道路有一定的区别，所以行驶高速公路的车辆、司机和乘客，要遵守一些附加的交通规则。这些基本上是：
超车（在香港也称为爬头）：只应该按照法律的规定超车（在实行左侧通行的只能右侧超车，在实行右侧通行的只能左侧超车）。但是，在一些地方，允许在塞车中右行（或左行）“通过”，而非超车。
行驶：只可以在主线车道道（和在必要时间，在超车道）行驶。路肩、匝道与紧急停车湾里不能行驶。但是，基于交通纾解的需要，台湾的高速公路会开放固定时段以及特定路段得路肩供驾驶人使用，以暂时解决道路容量不足的问题。
停车：不准在超车道和行车道上停车，只准在车辆故障或其他意外时在路边（在应急车道里面）停车，停车之后应当放置应急标志，以便警告其他车辆注意。
车速：不足低限速者，以及超速者（所谓“飙车”），都是违法行为，尤其对于超速，会有比较昂贵的罚金，甚至于会扣留或者吊销驾驶执照。
上其他与地区的一些相关规定：
台湾：基于许多顾虑，高速公路不开放重型摩托车行驶，但担任国宾车队护卫及开导任务之宪警、执行紧急勤务之公路或执行高速公路隧道紧急任务之摩托车，不受此限制。
中国：以前新司机在次领到驾驶执照之后的年不准开车上高速公路，同时新司机在这一年内要在车尾部贴上统一核发的“实习”标志，以确定是否是新司机。这个规定在《中华人民共和国道路交通法》后审议表决通过之前被法律人士删除。
瑞士：已在即将驶出高速的匝道车辆，可以右侧“通过”车辆。此外，万一在上路时遇到无常驶入行车道的事况，可在停车带短距离行车，但必须在早的时间进入行车道。
美国：美国各州有关高速公路的法规都不尽相同，但大多数州都有规定多轴车，如大货车和连接车，应驶于外线。另外，大多数驾驶者都有“位在越内线的车辆应该开越快”的默契。